關於單株抗體

單株抗體的製作

1.將抗原打入老鼠體內，其抗原通常有許多抗原決定基(在此圖只列出4個抗原決定基)，則老鼠會產生免疫反應(如B細胞)，生成對抗這4種抗原決定基的抗體。

2.取出老鼠的脾臟細胞，將它和骨髓癌細胞融合，這樣的融合細胞即為hybridoma。融合後馬上以HAT培養，能活下來的都是上述 B 細胞與骨髓癌細胞的正確融合細胞，但此時細胞的遺傳背景尚未十分穩定。

3.篩選專一性抗體：並非所有 B 細胞都會產生我們所要的抗體，小白鼠原先就存在許多 B 細胞株對抗一般疾病；因此要用酵素免疫分析法 (ELISA)挑出專一性抗體

4.單株化(次選殖 subcloning)：這樣所挑出來的細胞株，也許仍含有兩群以上的細胞，因此要進行單株化；先將該細胞株稀釋，重新平分到 96 槽細胞培養盤中，以計算使得每槽中只含有一個細胞，使其生長成群落後，再次以 ELISA 篩選專一性抗體。

5.抗體的產生可分兩種方法︰(1) 可把挑選出來的融合細胞打入小鼠腹部，誘生腫瘤，然後以針頭收集所產生的腹水，腹水中的抗體濃度非常高。 (2) 把融合細胞在大型培養槽中培養，收集培養液上清即得抗體，濃度較腹水稀約一千倍。

單株抗體的優點：

(1) 它有很高的特異性，由於單株抗體是單一的抗體群，只會與單一的抗原點（epitope）結合，所以不致錯誤地連接在不相關的東西上

(2) 它有很高的敏感性（sensitivity），因此可以選擇及控制單株抗體的性質與濃度，用以作出高敏感度的工具

(3) 可以十分方便且無限制製造純度相當高的單株抗體以供應用。